ФГУ «НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздравсоцразвития РФ, Санкт-Петербург
Рак толстой кишки по показателям заболеваемости и смертности населения занимает одно из ведущих мест в структуре онкологических заболеваний в России и большинстве развитых стран мира. Одной из наиболее значимых соматических мутаций в опухолях толстой кишки является мутация в гене KRAS. Она является ранним событием в канцерогенезе рака толстой кишки, предваряющим нерегулируемую клеточную пролиферацию и злокачественную трансформацию. Однако, по данным международных исследований, связь мутации в гене KRAS с распространением опухолевого процесса остается до конца не подтвержденной.
Целью исследования было оценить роль мутации в гене KRAS в развитии и метастазировании злокачественных опухолей толстой кишки.
Были проанализированы клинические данные о 208 больных КРР, получавших лечение в НИИ онкологии в 2005—2006 гг. Материалом исследования служили 137 образцов опухолевой ткани из первичной опухоли и/или местных рецидивов и отдаленных метастазов, залитые в парафиновые блоки, от 135 больных. Из них больных раком ободочной кишки было 36 человек, больных раком прямой кишки — 99. Все опухолевые образцы были подвергнуты микродиссекции, затем по стандартному протоколу произведено выделение ДНК из парафиновых срезов. На основании результатов отклонения температурных кривых плавления ДНК были отобраны образцы для проведения ПЦР и секвенирования полученного материала.
В результате проведенного исследования мутации в гене KRAS были обнаружены у 48 больных. 44 мутации обнаружены в 12-м и 13-м кодонах, 3 мутации в 61-м кодоне и одна — в 146-м кодоне. Таким образом, частота мутаций в гене KRAS у больных раком толстой кишки составляет (35,6±4,1)%.
При анализе распределения больных по полу отмечено незначительное преобладание женщин среди общего числа больных. При этом у женщин почти половина всех опухолей содержали данную мутацию, в то время как у мужчин мутацию KRAS содержали менее трети опухолей.
Средний возраст больных составил (62,63±11,70) года. При анализе распределения мутаций по возрастным группам отмечено постепенное нарастание частоты мутаций от 40 к 80 годам. Это подтверждает теорию накопления мутаций с возрастом и их решающую роль в развитии злокачественной трансформации.
Было сопоставлено наличие мутации в гене KRAS с наличием злокачественных новообразований у кровных родственников пациентов. Было обнаружено, что у тех больных, у которых была обнаружена мутация в опухоли, отягощенный онкологический семейный анамнез отмечен значительно реже, чем у больных с так называемым диким типом гена (29,2 и 43,7% соответственно, р<0,05).
Проведено сопоставление мутации в гене KRAS с наличием синхронных полипов в толстой кишке. У больных с мутацией в опухоли синхронные полипы толстой кишки встречались достоверно чаще, чем среди больных с диким типом гена в опухоли (16,7 и 6,9% соответственно, р<0,05).
При анализе частоты мутации в зависимости от локализации опухоли было обнаружено, что у больных раком ободочной кишки она составила 22,2%, у больных раком прямой кишки — почти в 2 раза больше (40,4%). При этом было отмечено значительное нарастание частоты мутаций от верхнеампуляр-ного к нижнеампулярному отделу прямой кишки. Все эти данные свидетельствуют, что в разных отделах толстой кишки развитие злокачественной опухоли обусловлено различными причинами, что необходимо учитывать при выделении групп риска развития рака и лечения уже развившейся опухоли.
Метастазы в регионарных лимфатических узлах отмечены у трети больных (34,73%). У больных с мутацией они были выявлены в 46,2% случаев, без мутации — в 29,3% случаев (р<0,05). При сравнении распределения больных по стадиям в группах с мутацией в гене KRAS и без мутации отмечено, что удельный вес больных со II стадией заболевания составил 26,8% в группе с мутациями против 42,5% в группе без мутаций; доля больных с III стадией, напротив, составила 34,1% против 16,3% соответственно (р<0,01).
На основании проведенных исследований было обнаружено, что статус гена KRAS определяет развитие и лимфогенное метастазирование злокачественных опухолей толстой кишки. Значительно более частое сочетание злокачественной опухоли и синхронных полипов толстой кишки у больных с мутацией в гене KRAS, вероятно, свидетельствует о том, что у таких больных эпителий толстой кишки представляет собой «опухолевое поле». Риск развития метахронных опухолей толстой кишки у этой группы больных существенно повышен, что необходимо учитывать в разработке стандартов динамического наблюдения этих больных.
Обнаруженная тенденция ассоциации мутации с частотой обнаружения метастазов в регионарных лимфатических узлах свидетельствует о более агрессивном течении заболевания с KRAS-мутацией в клетках опухоли. На этом основании мутация KRAS, несомненно, должна учитываться при планировании комплексного лечения больных раком толстой кишки.
